ምክንያቱም ዲዲኤንቲፒዎች ከሃይድሮክሳይል ቡድን (-OH) ይልቅ ከዲኦክሲራይቦዝ 3'-C ጋር ተያይዘው የሃይድሮጂን ሞለኪውል (-H) ስላላቸው ከማንኛውም ገቢ ኑክሊዮታይድ ጋር ማያያዝ አይችልም። ስለዚህ የዲኤንቲፒዎች በዲኤንኤ መባዛት የተውህዱን ምላሽ ለማቋረጥ ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል።
ለምንድነው ዲኤንቲፒ እያደገ ባለው የDNA ፈትል ውስጥ ሲካተት የዲኤንኤ ውህደት ለምን ይቆማል?
የተጨመረው ኑክሊዮታይድ "ዳይኦክሲኑክሊዮታይድ" (ምስል 6.29) ከሆነ የየሚበቅለው 3' ጫፍ አሁን ከኦኤች ይልቅ H ይኖረዋል። ይህ ተጨማሪ ኑክሊዮታይዶች እንዳይጨመሩ ይከላከላል; ማለትም፣ in vitro DNA ውህደቱ በዚህ ጊዜ ይቆማል።
አንድ ዲኤንቲፒ የዲኤንኤ ውህደትን እንዴት ያጠፋል?
አንድ ዲኤንቲፒ ወደ ኑክሊዮታይድ ሰንሰለት ሲካተት፣ ውህደት ያበቃል። ምክንያቱም የዲዲኤንቲፒ ሞለኪውል 3' ሃይድሮክሳይል ቡድን ስለሌለው በሰንሰለቱ ውስጥ ካለው ቀጣይ ኑክሊዮታይድ ጋር ማገናኛ ለመፍጠር ያስፈልጋል።
ለምንድነው DdNTPs የማባዛት ሂደቱን ያቆማሉ?
የላብራቶሪ ዘዴዎች በኢንዛይሞሎጂ፡ DNA
Dideoxynucleotide triphosphates በማደግ ላይ ባለው የዲኤንኤ ሰንሰለት ውስጥ በቀላሉ ይካተታሉ፣ነገር ግን ሰንሰለቱ እንዲቀጥል የሚያስችለው የ3′ ሃይድሮክሳይል ቡድን ይጎድላቸዋል ፣ እና ፖሊሜራይዜሽን በተሳካ ሁኔታ ያቋርጡ።
Dideoxynucleotides ለምን የዲኤንኤ መባዛት እንዲቆም ያደርገዋል?
እነዚህ ዲኤንቲፒዎች የ 3′-OH ቡድን የላቸውም በሁለት መካከል የፎስፎዲስተር ቦንድ ለመመስረት የሚያስፈልገውኑክሊዮታይድ፣ ይህም የዲኤንኤው ገመድ ማራዘሚያ ddNTP ሲጨመር እንዲቆም ያደርጋል።
