ትራይፕሲንዝዝድ ማለት ምን ማለት ነው?

2024 ደራሲ ደራሲ: Elizabeth Oswald | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2024-01-13 00:03

ትራይፕሲንናይዜሽን ፕሮቲኖችን የሚሰብር ትራይፕሲን የተባለ የፕሮቲንቲክ ኢንዛይም በመጠቀም ተጣባቂ ሴሎችን ከሰለጠኑበት መርከብ ለመለየት የሴል መለያየት ሂደት ነው። ወደ ሴል ባህል ሲጨመር ትራይፕሲን ሴሎቹ ከመርከቧ ጋር እንዲጣበቁ የሚያስችሉትን ፕሮቲኖች ይሰብራል።

ህዋሶችን ለምን እንሞክራለን?

Trypsinization ብዙውን ጊዜ ወደ ሴሎች ወደ አዲስ መያዣ እንዲተላለፉ፣ ለሙከራ ምልከታ ወይም በመቶኛ በማስወገድ በጠርሙሱ ውስጥ ያለውን የመግባባት መጠን ለመቀነስ ይደረጋል። ሴሎቹ።

እንዴት ትራይፕሲን ሴሎችን ለመለያየት ይሰራል?

Trypsin/EDTA ሕዋሳትን የመለየት ዘዴ ነው። ትራይፕሲን በሴል-ሴል እና በሴል-ማትሪክስ መስተጋብር ውስጥ የሚገኙትን የማጣበቅ ፕሮቲኖችን ይቆርጣል የላይሲን ፕሮቲኖች አሚኖ አሲድ በተለይ በላይሲን ወይም aginine በ C-terminal ላይ በመቁረጥ የላይኛው አሚኖ አሲድ ፕሮላይን ካልሆነ።

እንዴት ትራይፕሲንዝዝድ አድሬንት ሴሎችን ያገኛሉ?

ሂደት

1. መካከለኛውን ከባህል ዕቃ ውስጥ በምኞት ያስወግዱ እና ሞኖላይተሩን በጨው መፍትሄ ከካ²⁺ እና Mg 2+ ^{ሁሉንም የሴረም ምልክቶች ለማስወገድ። …}
2. የቲሪፕሲን ወይም ትራይፕሲን/ኤዲቲኤ መፍትሄ በቂ የሆነ የቲሪፕሲን ወይም የትራይፕሲን/ኤዲቲኤ መፍትሄ ወደ ባህል እቃዎች (ዎች) በማውጣት የሴሎችን ሞኖላይየር ሙሉ በሙሉ ይሸፍኑ እና በ37°C ኢንኩቤተር ውስጥ ለ~2 ደቂቃ ያስቀምጡ።

ትራይፕሲንን በሴል ባህል እንዴት ማሰናከል እችላለሁ?

አንድ ጊዜ ሕዋሶች ተለያይተው ከታዩ 2 ጥራዞች ይጨምራሉ ትራይፕሲን እንዳይሰራ ቅድመ-ሙቅ ሙሉ የእድገት ሚዲያ። >95% ህዋሶች መመለሳቸውን ለማረጋገጥ በሴል ሽፋን ላይ ብዙ ጊዜ በቧንቧ በማፍሰስ መካከለኛውን በቀስታ ይበትኑት። ከሴረም ነፃ ለሆኑ ባህሎች፣ አኩሪ አተር ትራይፕሲን ማገጃ (የምርት ቁጥር